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细菌蛋白提取试剂盒
 产品货号: RTD8101
 产品名称: 细菌蛋白提取试剂盒
 产品价格/规格: 100次 400元
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 更新时间: 2019-10-18
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  • 细菌蛋白提取试剂盒(100次)  货号:RTD8101

    产品组份及规格

    产品编号

    名称

    规格

    贮存

    运输

    RTD8101-01

    细菌蛋白提取缓冲液

    100 ml

    4

    常温

    PM1790

    100 mM PMSF100×

    10 ml

    RT

    (配制后-20℃

    常温

    RTD8101-03

    溶菌酶(50mg/ml

    1 ml

    -20℃

    湿冰

    RTD8101-04

    DNase I1000U/ml

    100 μl

    -20℃

    湿冰

    产品简介

    细菌蛋白提取试剂盒使用温和的非离子型去污剂,适用于大肠杆菌表达的重组蛋白提取。提取过程中不需进行超声破碎等复杂的操作步骤,有效避免了外源蛋白的污染。该试剂盒在抽提试剂的基础上添加了溶菌酶、DNaseⅠ和蛋白酶抑制剂PMSF,可提高蛋白提取效率并减轻因DNA引起的粘稠现象,有效避免蛋白降解。所提取的蛋白保持了生物学活性,可进行IP、Western blot实验;提取体系中不含EDTA,可直接通过Ni-NTA 等纯化填料进行蛋白纯化。该试剂盒既可适用于小量蛋白表达检测,也适用于大量蛋白的表达纯化试验。

    每次提取使用1ml 缓冲液计算,该试剂盒可以使用100次。

    ●    贮存条件:

    试剂组份按照温度贮存,可保存 12个月。

    ●    使用方法:

    1. 8,000 rpm常温离心 3 min 后,弃上清,尽量弃除残余培养基,留取管底部菌体。

    2. 即用型提取缓冲液配制:每ml 提取缓冲液中加入10 μl PMSF,10 μl 溶菌酶,1 μl DNase I,混匀后4℃贮存备用。注:该缓冲液现用现配,不建议贮存。

    3. 按照原菌液1/2-1/5体积加入即用型提取缓冲液,即2-5 ml菌液收集的菌体加入1 ml 提取缓冲液,用吸头吹打至无可见细胞团块,重悬菌体。

    4. 20-37孵育 15-20 min,期间轻弹离心管数次以加速裂解。

    注:若蛋白表达量较低,建议结合超声破碎,置冰上后,采用300w,10s 超声/10s 间隔,超声20min,至菌液变清亮。

    5. 裂解完成后 13,000rpm4℃离心5 min,将上清(上清中即为可溶性蛋白)转移至新的离心管中,直接进行下一步纯化或检测实验。

    6. 蛋白提取物分装后建议-80℃保存。



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