免费咨询电话: 400-699-0631      点击这里给我发消息
 
 
 
产品分类
 
·PCR
 
 
 





植物总蛋白提取试剂盒(适用于模式植物)
 产品货号: RTD8102
 产品名称: 植物总蛋白提取试剂盒(适用于模式植物)
 产品价格/规格: 20次 300元
 产品说明书: 点击查看
 更新时间: 2019-08-08
详细信息   访问次数:

  • 产品介绍
  • 发表文章
  • 相关产品

  • 植物总蛋白提取试剂盒(适用于模式植物)

    Plant Total Protein Isolation Kitfor model plant

    产品货号及规格

    产品编号

    名称

    规格

    贮存

    运输

    RTD8102-01

    试剂A-样本杂质去除剂

    20 ml

    常温

    常温

    RTD8102-02

    试剂B-植物蛋白提取缓冲液I

    15 ml

    4

    常温

    PC2030-03

    蛋白酶抑制剂混合物(100×,植物样品用)

    0.2 ml

    -20

    湿冰

    DT0140

    DTT100×)

    1 ml

    常温(配制后-20)

    常温

    PL080

    5×MonoClolor 蛋白上样缓冲液

    1 ml

    -20

    湿冰

    产品简介

    本产品用于快速提取模式植物的总蛋白,可以处理各种常见模式植物如拟南芥、小麦、烟草、玉米、水稻等植物的叶片、茎和根等。得到的蛋白可用于SDS-PAGE凝胶电泳和Western印迹分析。

    该试剂盒对模式植物的幼嫩组织有更好的提取效果,衰老组织和富含多糖多酚植物的蛋白提取效果不佳。此类植物的蛋白提取可以选择通用型植物蛋白提取试剂盒(货号:RTD8103)。

    该试剂盒含有除丙酮外的其他所有试剂,使用方便,能在2小时内得到高纯度的蛋白样品。

    每次提取使用0.7 ml试剂B-植物蛋白提取缓冲液I计算,该试剂盒可以使用20次。

    ●    使用方法:

    实验准备材料:

    液氮;研钵;1.5ml离心管;丙酮;70℃水浴锅;干浴器;冷冻离心机;制冰机;涡旋振荡器。

    I 样品破碎

    1. 取植物样本(每个样本取0.2-0.5),在液氮条件下,用研钵充分研磨成粉末。

    注:此步骤非常重要,样本研磨越细越好,研磨不彻底会导致蛋白浓度偏低。

    II 沉淀杂质:

    2. 取1.5 ml离心管,加入1 ml即用型试剂A(按照下表配制),迅速将粉末加入其中,漩涡混匀,RT 放置5分钟。

    即用型试剂A-样本杂质去除剂配制

     

    即用型试剂A

     

    1个样品

    2个样品

    n个样品

    试剂A-样本杂质去除剂

    0.5 ml

    1 ml

    n×0.5 ml

    丙酮

    0.5 ml

    1 ml

    n×0.5 ml

    DTT100×

    10 μl

    20 μl

    n×10 μl

    3.12000g4离心5分钟,去除上清,保留沉淀。

    注:观察沉淀颜色,如沉淀颜色为绿色,继续步骤4;如沉淀颜色为浅色或白色,跳过步骤4,直接进行步骤5

    4. 沉淀中加入1 ml即用型试剂A,漩涡混匀,RT放置5分钟,12000rpm4离心5分钟。

    5. 沉淀中加入1 ml 预冷的丙酮(自备,试剂盒不提供)和10 μl DTT溶液,漩涡震荡(此时溶液状态应为白色悬液),彻底重悬,12000rpm4离心5分钟,去除上清,收集沉淀。

    6. 快甩离心数秒,残留上清用移液器彻底吸弃,沉淀物通风晾干1-2分钟至沉淀干燥。

      注:沉淀不能过分干燥,否则会影响以下步骤蛋白的溶解性。

    III 蛋白提取

    7. 蛋白沉淀中加入0.7 ml 即用型试剂B(按照下表配制),漩涡震荡,彻底重悬沉淀(此时溶液状态为悬浮溶液);70水浴1小时,间歇混匀。

    即用型试剂B-植物蛋白提取缓冲液配制:

     

    即用型试剂B

     

    1个样品

    2个样品

    n个样品

    试剂B-植物蛋白提取缓冲液I

    0.7 ml

    1.4 ml

    n×0.7 ml

    蛋白酶抑制剂混合物(100×

    7 μl

    14 μl

    n×7 μl

    DTT100×

    7 μl

    14 μl

    n×7 μl

    8.12000g4离心10分钟,小心取上清(通常可取600 μl)于1.5ml离心管中,不要吸取沉淀。

    9. 蛋白样品-20℃贮存或进行下游电泳及Western Blot等实验。

    注:   如要浓缩蛋白,可以选择蛋白浓缩试剂盒(货号:RTD9101)。

               由于提取过程中使用了DTT,为了避免对蛋白浓度测定的影响,建议蛋白浓度测定使用Bradford方法(货号:RTP7101)。



TOP】【打印本页】【关闭窗口



中科瑞泰(北京)生物科技有限公司 版权所有 京ICP备12052607 网站管理   快递查询   IF查询
电话:010-58437227 免费电话:400-699-0631 传真:010-57909566
点击这里给我发消息   内勤订货QQ:2446698252   技术支持QQ:460449375 电子邮箱:real-times@vip.163.com
注意:公司所有产品仅供科研使用
_×
在线咨询