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RTR2103 RTScript All-in-One 1st-Strand cDNA Synthesis Kit
 产品货号: RTR2103
 产品名称: RTR2103 RTScript All-in-One 1st-Strand cDNA Synthesis Kit
 产品价格/规格: 50次 600元
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 更新时间: 2021-05-22
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  • RTScript All-in-One 1st-Strand cDNA Synthesis Kit

    ●  产品货号及规格:

    货号

    包装

    贮存

    RTR2103-01

    50×20μl

    -20

    ●  产品组成:

    组成

    包装

    5×RTScript 1st Strand cDNA Synthesis MasterMix

    200 μl

    gDNA Remover

    50 μl

    10×gDNA Remover Buffer

    100 μl

    RNase-free H2O

    1 ml

    ●  产品简介:

    本试剂盒含有反转录需要的全部试剂(RTScript MMLv Reverse Transcriptase,RNase Inhibitor,dNTP、反应 Buffer,Oligo (dT)18,Random primer),浓度为5×。进行RNA反转录反应时,只需加入模板和RNase Free H2O 即可高效合成第一链cDNA,大大简化了操作过程、提高了效率、减少了操作过程中的人为误差。本制品含有去基因组成分gDNA Remover,以RNA为模板进行cDNA第一链合成时,可以同步去除基因组DNA污染,与传统DNaseI消化对比,gDNA Remover消化后无需加入EDTA进行失活;反应结束后,65℃加热2分钟,就可以不可逆失活。具有快速简便、重复性高、特异性好、灵敏度高和稳定性好的特点。该试剂盒采用的反转录酶去除了 RNase H活性,从而避免反转录过程中降解RNA。 同时经过突变文库筛选,使得其热稳定性更强,可耐受50℃高温反应。相比于低温条件下反转录反应,采用高温反转录可显著打开 RNA二级结构,从而提高复杂 RNA 模板的扩增性能、提高反转录 cDNA的长度(可以获得12 kb cDNA)和产量,从而提高后续检测的灵敏度。合成的第一链 cDNA可广泛用于 2nd Strand 的合成、 杂交、 PCR扩增、Real-Time PCR 反应等。

    ●  贮存和运输:

    开封后-20℃贮存两年;湿冰运输。

    ●  使用方法:

    . 去除基因组DNA污染:

    1.1冰上配制如下体系:

    组份

    加入体积

    Total RNA/mRNA

    100ng-2μg(8 μl)

    gDNA Remover

    1μl

    10×gDNA Remover Buffer

    1 μl

    RNase-free H2O

    up to 10 μl

    1.2轻柔混匀,快甩离心,37处理 2 min,去除基因组污染,冰上放置。

    注:若RNA中基因组DNA污染严重,可以延长37℃处理5 min。

    1.3 65℃处理2 min,失活gDNA Remover,冰上放置。

    . 第一链cDNA合成(反转录反应)

    2.1冰上配制如下体系:

    组份

    加入体积

    步骤1中的反应液

    10 μl

    5×RTScript 1st Strand cDNA Synthesis MasterMix

    4 μl

    RNase-free H2O

    6 μl

    2.2 反转录:轻柔混匀,快甩离心; 50℃孵育15 min,

    2.3 终止反应:85℃孵育 5 min,终止反应。

    反应产物可直接用于 PCR,如果不立即使用,-20℃ 保存,长时间保存建议-80℃ 放置。

    ●  注意事项:

        5×RTScript 1st Strand cDNA Synthesis MasterMix中已经包含Oligo (dT)18和Random primer,不仅适用于包含poly(A)结构的真核生物mRNA,也适用于不含poly(A)结构的原核生物RNA,真核生物rRNA和tRNA等模板,但不适用于miRNA等小RNA模板。



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