免费咨询电话: 400-699-0631      点击这里给我发消息
 
 
 
产品分类
 
·PCR
 
 
 





RTP3104 PAGE凝胶DNA回收试剂盒(吸附柱法)
 产品货号: RTP3104
 产品名称: RTP3104 PAGE凝胶DNA回收试剂盒(吸附柱法)
 产品价格/规格: 50次 500元
 产品说明书: 点击查看
 更新时间: 2022-08-29
详细信息   访问次数:

  • 产品介绍
  • 发表文章
  • 相关产品
  • 质检证书
  • PAGE凝胶DNA回收试剂盒(吸附柱法)(目录号:RTP3104

    试剂盒内容及保存:

    试剂盒组成

    RTP3104 50次)

    贮存

    提取液A

    10 ml

    RT

    结合液B

    50 ml

    RT

    助沉剂C

    10 ml

    RT

    漂洗液PW(浓缩液)

    25 ml

    RT

    洗脱缓冲液EB

    15 ml

    RT

    3 M NaAc pH5.2

    500 μl

    RT

    吸附柱CA1

    50

    RT

    套管

    50

    RT

    塑料研磨杵

    5/

    RT

    说明书

    1

     

    运输、储存条件和效期:

    常温运输,常温保存,有效期为一年。

    产品简介及使用说明:

    本试剂盒适用于从PAGE 胶中回收50-500 bp 的双链DNA 片段,回收效率可达30-80%。该试剂盒采用特殊的吸附膜,能够有选择性地吸附核酸分子,去除其他杂质,得到高质量的DNA回收产物。所得到的DNA可直接用于酶切、连接、测序等后续的分子生物学试验。

    注:该试剂盒也能回收单链DNA片段,但回收效率偏低。

    本试剂盒具有以下特点:

    1. 适用范围广,回收效率高,对于50-500 bp之间的DNA片段,回收效率在30-80%。

    2. 操作简单快速

    3. 无需酚氯仿抽提,无需乙醇沉淀。

    按照每次使用200 μl提取液A计算,试剂盒可以使用50次。

    使用方法:

    1.电泳:

    PAGE电泳后染色观察DNA 并确定需要回收的DNA 条带的位置,确保目的DNA片段与其他片段分开。

    2.切胶:

    用干净的刀片小心切取含DNA片段的PAGE凝胶到一个干净的1.5 ml离心管中。

    注:尽可能多地把多余的胶切除,否则多余的凝胶会降低DNA的回收效率。

    3.DNA提取:

    3.1 根据胶块重量,每100 mg胶块加200 μl比例加入提取液A(如胶块不足100 mg,用灭菌水补足100 mg),用塑料研磨杵充分将凝胶块捣碎。

    注:胶的重量控制在0.3克以下为宜,否则会导致DNA片段扩散提取不完全。

    3.2  55℃水浴30分钟,间隙混匀,促进凝胶中的DNA扩散到溶液中。

    3.3  13000 rpm离心5分钟,小心将上清液(含DNA片段)转移到一个新的1.5 ml离心管中。

    4. 上清液中依次加入3倍上清体积结合液B和1倍上清体积的助沉剂C,混匀。

    注:如果此时溶液变为粉红色,请加入少量3MNaAc pH5.2(一般说来,10 μl足矣),使溶胶液变为黄色再上柱离心。

    5. 将上一步所得溶液加入到吸附柱CA1中(吸附柱放入收集管中),常温放置2分钟,13,000 rpm离心60秒,倒掉收集管中的废液,将吸附柱重新放入收集管中。

    注:吸附柱CA1的有效容积为750 μl,如溶液体积大于750 μl,分次上柱,保证全部溶液都加到吸附柱中。

    6. 向吸附柱CA1中加入700 μl漂洗液PW(使用前请先检查是否已加入无水乙醇),13,000 rpm离心60秒,倒掉废液,将吸附柱重新放入收集管中。

    7. 向吸附柱CA1中加入500 μl漂洗液PW,13,000 rpm离心30-60秒,倒掉废液。

    8. 将离心吸附柱CA1放回收集管中,13,000 rpm离心2分钟,尽量除去漂洗液。

    注:此步必不可少!如果漂洗液有残留会影响回收效率和DNA质量,进而影响下游实验;离心后将吸附柱盖子打开,常温放置2分钟,这样将有助于彻底挥发残余乙醇。

    9. 将吸附柱放到一个干净1.5 ml离心管中,向吸附膜中间位置悬空滴加适量65℃预热的洗脱缓冲液EB(一般不要少于30 μl),常温放置2分钟。13,000 rpm离心1分钟收集DNA溶液。

    注:CA1柱的洗脱体积不应少于30 μl,体积过小将会降低回收效率;洗脱液的pH值对于洗脱效率有很大影响。由于PAGE胶中片段较小,不建议用水进行洗脱。

    10. DNA产物-20℃保存。

    实验示例:

    片段范围

    回收效率

    25 bp

    10%

    25-50 bp

    30%

    50-100 bp

    ~70%

    大于100 bp

    ~80%

     


TOP】【打印本页】【关闭窗口



中科瑞泰(北京)生物科技有限公司 版权所有 京ICP备12052607 网站管理   快递查询   IF查询
电话:010-58437227 免费电话:400-699-0631 传真:010-57909566
点击这里给我发消息   内勤订货QQ:2446698252   技术支持QQ:460449375 电子邮箱:real-times@vip.163.com
注意:公司所有产品仅供科研使用
_×
在线咨询