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2×CTAB提取缓冲液
 产品货号: RTG2405
 产品名称: 2×CTAB提取缓冲液
 产品价格/规格: 200ml 150元
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 更新时间: 2018-08-27
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    ● 产品编号及规格:

    货号

    名称

    规格

    贮存

    RTG2405-01

    2×CTAB提取缓冲液

    200 ml

    RT

    RTG2405-02

    还原剂

    1 ml

    RT

     

    说明书

    一份

     

    ● 产品介绍:

        CTAB (hexadecyltrimethylammonium bromide,十六烷基三甲基溴化铵),是一种阳离子去污剂,具有从低离子强度溶液中沉淀核酸与酸性多聚糖的特性。在高离子强度的溶液中(>0.7mol/L NaCl) CTAB与蛋白质和多聚糖形成复合物而不沉淀核酸。通过有机溶剂抽提,去除蛋白、多糖、酚类等杂质后加入乙醇沉淀即可使核酸分离出来。

        2×CTAB提取缓冲液成分:2%(w/v)CTAB100mM Tris (pH 8.0)20mM EDTA,1.4 MNaCl,0.2%(v/v) 还原剂(随用随加)

    ● 储存条件:

       室温贮存一年。加入还原剂后4℃贮存。

    ● 实验操作步骤:

       1. 2×即用型CTAB提取液配制:

    按照终浓度0.2% v/v)加入还原剂,如100ml 2×CTAB提取缓冲液中加入0.2 ml 还原剂。加入还原剂后的2×即用型CTAB提取液4℃贮存。

    2. 0.2-0.5新鲜植物材料,于液氮中研磨成粉末。

    3. 将粉末转入预冷的1.5ml离心管中,立即加入0.7 ml 2×即用型CTAB提取缓冲液,65℃水浴30分钟,间歇混匀。

    4. 加入等体积的酚:氯仿:异戊醇(25:24:1),轻缓颠倒离心管混匀8-10次,常温12000 rpm 离心10分钟。

    5. 将上清液转入另一1.5ml离心管中,加入等体积酚:氯仿:异戊醇(25:24:1),颠倒离心管混匀8-10次,常温12000 rpm离心10分钟。

    6. 将上层水相转入新的1.5 ml离心管中,加入0.6倍体积的冰冷异丙醇,轻柔混匀,冰浴30分钟。

    7. 12000 rpm4 离心10分钟。

    8. 去上清液, 加入1ml 70%乙醇漂洗沉淀,412000 rpm 3分钟,吸弃乙醇。

    9.4 12000 rpm 1分钟,用移液器吸尽残余乙醇,超净台吹干沉淀。

    注:沉淀不能彻底干燥,否则不好溶解。

    10. 加入30-50μl的超纯水或TE缓冲液溶解DNA-20℃保存备用。


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