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·PCR
 
 





DNase I溶液(蛋白提取用)
 产品货号: RTT2103
 产品名称: DNase I溶液(蛋白提取用)
 产品价格/规格: 10KU 300元
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 更新时间: 2018-03-29
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  • DNase I溶液(蛋白提取用)

    DNase I Solutionfor protein isolation

     

    ●     产品组成:

    货号

    名称

    规格

    RTT2103-01

    DNase I粉末

    10 KU

    RTT2103-02

    DNase I溶解液

    5 ml

    RTT2103-03

    1M MgCl2

    5 ml

    ● 保存:-20℃粉末未配制有效期3年;DNaseI配制成溶液后-20℃有效期一年。

    产品简介:

    脱氧核糖核酸酶Ⅰ(DNaseⅠ)是一种非特异性核酸酶切酶,可用于降解单链或双链DNA,其原理为DNaseⅠ水解磷酸二酯键产生带有5'-磷酸基团和3'-OH的单核苷酸或寡核苷酸。   本产品能迅速水解核酸,降低粘度以减少处理时间和增加蛋白产量。该酶可以与细菌蛋白提取液和RIPA 裂解液等蛋白抽提试剂配合使用。

    本产品RNase活性未检测,不能用于反转录反应(RT-PCR)中DNA的去除使用。RT-PCR中DNA污染的去除请选择RNase-free DNase I(货号:RTT2014)。

    活性定义:

    One unit of the enzyme completely degrades 1 μg of DNA in 10 min at37°C. 

    DNaseI溶解液组份:

    20 mMsodium acetate pH 6.5, containing5 mMCaCl2 and 0.1 PMSF, 50% (v/v) glycerol

    DNaseI失活或抑制:

    加入EDTA至终浓度为2.5mM后,65℃加热10分钟可使DNase I失活。酚氯仿抽提也可以使DNase I失活。金属离子螯合剂,达到毫摩尔/升浓度的锌离子,0.1%的SDS,DTT、巯基乙醇等还原剂,50-100mM以上盐浓度均对DNase I有显著抑制作用。

    使用方法:

     1、DNase I溶液的配制:取5ml DNase I溶解液全部加到DNase I粉末中,充分混匀,配成浓度为2000U/ml DNase I溶液。-20℃贮存。

    2、蛋白提取液中按照1/100 体积加入DNase I溶液(使其终浓度为20U/ml),1/100体积加入1MMgCl2,37℃处理30-60分钟。

       注:由于EDTA能螯合酶活性需要的Ca2+Mg2+,蛋白初始裂解液中要去除EDTA,否则会降低DNase的消化能力。

    3、继续后续蛋白提取实验。


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