Anti-PCNA抗体（鼠单抗）

Anti-PCNA Antibody（Monoclonal Antibody from Mouse）

● 产品简介

增殖细胞核抗原（Proliferating Cell Nuclear Antigen，PCNA）由Miyachi等于1978年在 SLE（系统性红斑狼疮）患者的血清中首次发现并命名，因其只存在于正常增殖细胞及肿瘤细胞内而得名，以后的研究发现PCNA与细胞DNA合成关系密切，在细胞增殖的启动上起重要作用，是反映细胞增殖状态的良好指标。PCNA是一种分子量为36 kD的蛋白质，在细胞核内合成，并存在于细胞核内，为DNA聚合酶δ的辅助蛋白，该蛋白对聚合酶的持续合成能力起重要作用。在细胞核内存在可溶性与不溶性两种PCNA，可溶性PCNA在细胞周期各期中均有表达，其量在DNA合成过程中不发生明显变化，易被去污剂提取、甲醇破坏；不溶性PCNA较稳定，不易被去污剂洗脱、甲醇破坏，这种PCNA在G0～G1期细胞中无明显表达，G1晚期，其表达大幅度增加，S期达到高峰，G2～M期明显下降，其量的变化与DNA合成一致，检测其在细胞中的表达，可作为评价细胞增殖状态的一个指标。

注：WB, Western blot; IP, Immunoprecipitation; IF, Immunofluorescence

本抗体如果用于常规的Western检测，至少可以检测50次。

● 贮存形式：

稳定溶液，1 mg/ml抗体溶于PBS，50%甘油，pH7.2。

● 保存及运输条件：

-20℃保存，一年有效；避免反复冻融；湿冰运输。

● 使用说明：

1. Western Blot杂交(ECL显色)：1:2000-5000稀释，常温孵育1-2 h或4℃过夜。

2. 免疫荧光（IF）和免疫组化（IHC）：1:200-1000稀释。

● 实验示例：

                    1           2         3         4           5

lane 1，5：ECL Marker；lane 2：总蛋白TP；lane 3：细胞浆蛋白，C-Pr；lane 4：细胞核蛋白，N-Pr

 Jurkat蛋白提取：总蛋用RIPA（货号：RL1020 ）提取。胞浆蛋白和核蛋白用动物细胞核蛋白与细胞浆蛋白抽提试剂盒（货号：RTD8301）提取。

 制胶和电泳：RealPAGE plus彩色凝胶快速制备试剂盒（货号：RTD6132-15）；200 V 55 min

 转膜：NC膜，1×RealBlot快速转膜液 400 mA 37 min

 封闭：Western无蛋白快速封闭液（货号：PF1070） RT封闭 20 min

 一抗： Anti-PCNA抗体（鼠单抗）（货号：APM5012） 1：5000

 二抗：HRP标记羊抗鼠IgG（货号：HGM1060）1：5000

 ECL发光：RealECL发光液（货号：EC2520）；化学发光成像系统（货号：RT523）拍照。