伊红染色液

Eosin Staining Solution

●     产品组成：

● 产品简介：

伊红(Eosin)是一种化学合成的酸性染料，在水中解离成带负电荷的阴离子，可以和蛋白质氨基上带正电荷的阳离子结合，可以使细胞胞浆染成不同程度的红色或粉红色，而苏木素染色液能将细胞核染成蓝色，与红色胞浆形成鲜明对比，从而使苏木素伊红(HE)染色成为病理组织切片中最广泛使用的一种常规染色方法。

本染色液可以重复使用，直至认为效果不佳时再换用新的染色液。一个包装的本染色液至少可以染色200个样品。

● 贮存：

RT避光保存，一年有效。

● 操作步骤：

1.  需要用户自己准备的试剂

a.  固定液： 4%多聚甲醛固定液。

b.  分化液(5%的乙酸溶液或0.5%的盐酸乙醇)；

c.  如果需要脱水、透明和封片处理，还需自备二甲苯，和封片剂及80%乙醇、90%乙醇、无水乙醇；

d.  70%乙醇。

2.  样品处理

a.  对于石蜡切片：

二甲苯中脱蜡5-10分钟。

换用新鲜的二甲苯，再脱蜡5-10分钟。

无水乙醇5分钟。

90%乙醇2分钟。

80%乙醇2分钟。

70%乙醇2分钟。

蒸馏水2分钟。

b.  对于冰冻切片：

固定液固定10分钟以上。

蒸馏水2分钟。

c.  对于培养细胞：

固定液固定10分钟以上。

蒸馏水洗涤2分钟。

换用新鲜的蒸馏水，再洗涤2分钟。

3.  伊红染色

对于上述处理好的样品：

伊红染色液染色30秒-2分钟(可以根据染色结果和要求调整时间)。 此时，如果需要直接观察，可以用70%乙醇洗涤2次。如需脱水、透明后封片按后续步骤进行，70%乙醇洗涤后仍可按照后续步骤进行脱水、透明和封片处理。

注：如果用于免疫组化等染色后的复染，可以参考上述步骤在其它染色完成后直接进行伊红染色。

4.  脱水、透明、封片或进行其它染色

a.  脱水、透明、封片：

70%乙醇10秒，80%乙醇10秒，90%乙醇10秒，无水乙醇10秒。二甲苯透明5分钟。

换用新鲜的二甲苯，再透明5分钟。

用中性树胶或其它封片剂封片。

显微镜下观察，细胞浆呈粉红色或红色。

b.  进行其它染色：

如果进行免疫荧光染色，或进行Hoechst等荧光染料的染色，在伊红染色液染色后： 70%乙醇洗涤2次，每次2分钟。 PBS或生理盐水或TBS或TBST等用于免疫染色或荧光染料染色的溶液浸泡5分钟。 然后就可以进行免疫荧光染色或其它荧光染料的染色了。如果免疫荧光染色效果不佳，可能染料对抗体结合有影响，请单独染色。