Anti-GAPDH抗体(兔单抗)
Anti-GAPDH Antibody(Monoclonal Antibody from Rabbit)
产品编号
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产品名称
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规格
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RGA1150
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Anti-GAPDH抗体(兔单抗)
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20 μl
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● 产品简介
甘油醛-3- 磷酸脱氢酶(
Glyceraldehyde 3-phosphate dehydrogenase,GAPDH) 是糖酵解(glycolysis)过程中的关键酶,分子量为37 kD左右。它催化甘油醛-3-磷酸的氧化磷酸化反应。
GAPDH 作为管家基因在同种细胞或者组织中一般是恒定、高水平表达的,常用作Western Blot
实验的内参照。
来源
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用途及稀释比例
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抗体类型
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GAPDH分子量
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Rabbit
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WB 1:3000-5000
IHC 1:200-1000
IF 1:200-1000
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单克隆抗体
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36-38 kD
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注:WB, Western blot; IHC, Immunohistochemistry;
IF, Immunofluorescence
本抗体如果用于常规的Western检测,稀释5000倍,一次使用5 ml稀释的抗体,至少可以检测20次。
● 贮存形式:
稳定溶液,1 mg/ml 抗体溶于PBS,50%甘油,pH7.2。
● 保存及运输条件:
-20℃保存,一年有效;避免反复冻融;湿冰运输。
● 使用说明:
1. Western Blot杂交(ECL显色):1:3000-5000稀释,常温孵育1-2 h或4℃过夜。
2. 免疫荧光(IF)和免疫组化(IHC):1:200-1000稀释。
● 实验示例:
实验程序 Jurkat 无去垢剂提取TP,GAPDH检测(pI~8.6):
凝胶:RTD6139-0416 BN预制胶
电泳:1×蓝色电泳缓冲液(含0.002% G-250)
稳压150V 45分钟;1×无色电泳缓冲液 稳压150V 46分钟
胶浸泡:1×BN转膜缓冲液(含20%甲醇)+0.1%SDS浸泡10分钟
转膜:1×BN转膜缓冲液(含20%甲醇),稳流200 mA
(电压89-81V) 1.5小时,未冰浴
膜漂洗去蓝色:PVDF膜无水甲醇浸泡10分钟至膜无色
封闭:无蛋白快速封闭,RT,30分钟
一抗:GAPDH抗体,1:5000 RT 一小时
二抗:羊抗兔IgG-HRP 1:5000 RT 1.5小时
ECL:ECL发光,机器拍照,曝光2min