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非变性蛋白电泳Marker转膜问题
http://www.real-times.com.cn/news_detail.aspx?NewsID=248
高分子量非变性电泳蛋白质Marker
II(45-669 kD)
High
Molecular Weight Native Electrophoresis Protein Marker II
● 产品编号及规格:
RTD6142 20次(100 μl)
● 储存及运输条件:
-20℃贮存;常温运输,开封后有效期为12个月。
● 产品简介:
本产品是5种蛋白质混合物,分子量范围为45-669kD,经过非变性电泳后,用考马斯亮蓝染色后可以得到分布均匀密度相近的5条带:
蛋白名称
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分子量(kD)
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说明
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pI
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Thyroglobulin
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669
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球蛋白
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4
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Ferritin
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440
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脱铁后铁蛋白单体
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5.3-5.8
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Recombinant
protein
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228
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昆虫球蛋白,单体分子量57 kD,非变性下为四聚体
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4.9-6.3
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BSA
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66
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球蛋白,单体分子量66 kD,非变性下可形成少量二聚体
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4.6-5.8
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Ovalbumin
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45
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球蛋白,分子量为45kD,非变性条件下大于45kD会出现电荷异构体(charge isomer)
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4.71或4.59
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● 使用说明:
1. 常温融化后,彻底混匀,上样电泳。
注:上样量根据胶的厚度和梳子的宽度确定。一般说来,0.75mm×5mm(厚度×宽度)的加样孔上样5 μl,其他规格梳子请适当调整上样量。
2. 电泳结束后,染色,观察结果。
注:使用银染时,由于灵敏度高于考马斯亮蓝染色方法,可以适当降低Marker上样量,一般稀释50倍。
注意:
1. 本蛋白Marker不适用于变性蛋白电泳(SDS-PAGE),因为在SDS存在下,含有多个亚单位的蛋白会不同程度解聚。
2. 在非变性条件下,蛋白的迁移与蛋白的电荷、蛋白形状以及蛋白分子量都有关。因此,在一种凝胶浓度下使用本Marker不能精确估计出目的蛋白的分子量。非变性电泳中,蛋白分子量的确定应该是在不同凝胶浓度下,确定出蛋白的Rf值,绘制出凝胶浓度对Rf的曲线从而判定蛋白的分子量。
● 实验示例:
8% Laemmli Native Gel(Cat:RTD6130)
1×TG 稳压150V 35-9 mA 85 min
lane 1,2 RTD6142 非变性蛋白Marker 5 μl
lane 3 BSA 2 μg
lane 4 Ovalbumin 2 μg
使用RTD6142高分子量非变性电泳蛋白质Marker
II(45-669 kD)产品发表部分文章列表:
1. [2021 IF=3.74] Cloning, expression, and
function of ferritins in the tick Haemaphysalis flava.
Author: Yu Zhao, Lei Liu, Jin-Bao Liu, Cong-Ying
Wu, De-Yong Duan, Tian-Yin Cheng
Marker: RTD6142 高分子量非变性电泳蛋白质Marker II(45-669
kD)
Journal: Ticks and Tick-borne Diseases. Volume
13, Issue 2, March 2022, 101892
Institution:College of Veterinary
Medicine, Hunan Agricultural University,
Paper link:https://linkinghub.elsevier.com/retrieve/pii/S1877959X21002454
2.
[2022 IF=2.9] Identification and structural analysis of
dimeric chicken complement
component 3d and its binding with
chicken complement receptor 2.
Author: Huan Jin, Min Tu, Zhaoying Meng, Bo Jiang,
Qianqian Yang, Yongqing Li,Zhenhua Zhang
Marker: RTD6142高分子量非变性电泳蛋白质Marker II(45-669 kD)
Journal: Developmental and Comparative Immunology 152
(2024) 105109
Institution: Institute
of Animal Husbandry and Veterinary Medicine, Beijing Academy of Agriculture and
Forestry Sciences
Paper link:https://doi.org/10.1016/j.dci.2023.105109