快速蛋白锌染试剂盒
产品编号
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规格
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运输
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RTD6206
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10 T
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RT
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● 产品组成: Ver.720359
产品编号
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产品名称
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规格
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贮存
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运输
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RTD6206-01
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增强液(100×)
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5
ml
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RT
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RT
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RTD6206-02
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染色液(10×)
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60
ml
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4-8℃
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RT
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RTD6206-03
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显色液(10×)
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60
ml
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4-8℃
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RT
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RTD6206-04
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脱色液(10×)
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100
ml
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4-8℃
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RT
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-
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说明书
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1份
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-
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-
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● 产品简介:
本试剂采用以锌离子为基础的负染色方法,用于SDS-PAGE或Native-PAGE电泳凝胶染色,不需要使用含有刺激性的甲醛和冰醋酸,实验方便快速,可以在30 min左右完成,最低能够检测出2 ng的蛋白条带,该方法不对蛋白质产生修饰作用,而且经过脱色液处理后,可以用于电洗脱或采用PAGE胶蛋白微量回收试剂盒(货号:RTD8108)进行胶回收,以便进行质谱和测序分析等,也可以用于电转移或用其他染色方法(银染或考染)对胶重新染色。
按照每次使用50 ml1×即用型染色液计算,本产品可以染色 8-10块mini-PAGE(8×10cm)胶。
● 储存条件
按照标签温度贮存,常温运输。开封后一年有效。
● 凝胶染色的操作步骤:
以下步骤以一块1 mm厚度8×10cm的凝胶操作为例。
一. 漂洗:
取出电泳后的 PAGE 凝胶,用超纯水漂洗两次,每次1分钟。
二. 染色:
2.1 准备1×即用型染色液:
组份
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50 ml 1×即用型染色液
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染色液(10×)
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5
ml
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增强液(100×)
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0.5
ml
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超纯水
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定容至50 ml
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2.1凝胶染色:
凝胶中加入50 ml 1×即用型染色液,常温摇床慢摇10分钟。
注:增强液(100×)在低温条件下会产生白色沉淀,请在使用前60℃水浴中加热,震荡至完全溶解后使用。
三. 漂洗:
弃染色液,用超纯水漂洗凝胶两次,每次1分钟,至泡沫完全清除干净。
四. 显色:
4.1 准备工作:将显色液(10×)用超纯水稀释10倍,配成1×即用型显色液。
4.2凝胶中加入 50 ml 1×即用型显色液中,摇床慢摇30-60秒。观察结果:在黑色背景下,可见光观察,蛋白条带为棕褐色,无蛋白区域为类白色;可见光灯箱观察(凝胶底部打光),蛋白质条带反显白色,无蛋白的胶区则为白色。
五. 漂洗:
弃显影液,超纯水洗涤凝胶2次,每次摇床慢摇1分钟。
注:凝胶可以在水中保存1-2周。
六. 脱色:
6.1 准备工作:将脱色液(10×)用超纯水稀释10倍,配成1×即用型脱色液。
6.2 如需要进行蛋白切胶回收,将所需的蛋白质条带切下,用超纯水漂洗切下的凝胶一次;如凝胶需要考染,银染或转膜实验,直接用超纯水漂洗整个凝胶一次。
6.3 弃水,凝胶中加入适量1×即用型脱色液覆盖凝胶,摇床慢摇5分钟,倒掉脱色液;
6.4 重复脱色步骤2次。脱色完全的标志是白色凝胶完全脱色为无色透明。
6.5 超纯水漂洗凝胶两次,进行后续实验操作。
● 实验示例:
4-20% RealPAGE Precast Gel
lane 1-4: BSA 10μg
M:RTD6149 10-250kD
lane 5: Bacterial Lysis
凝胶显影后(脱色前)蛋白条带在黑色背景下为棕褐色
可见光灯箱观察(凝胶底部打光),蛋白质条带反显白色