2×Taq
plus PCR MasterMix
● 产品包装:
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目录号
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包装
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2×Taq
plus MasterMix(不含染料)
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RTS3103-02
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500μl
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RTS3103-03
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5×500μl
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2×Taq
plus MasterMix(含染料)
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RTS3104-02
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500μl
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RTS3104-03
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5×500μl
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注:以50μl PCR反应体系为例,每次使用25μl 2×MasterMix,500μl可做20次 50μl PCR反应。
● 储存条件: -20℃可长期保存;4℃稳定贮存3个月。经常使用时,一旦融化后请4℃贮存,尽量避免反复冻融。
● 产品简介:
本产品包含Taq
plus DNA聚合酶、dNTPs、MgCl2、反应缓冲液、PCR反应的增强剂和优化剂以及稳定剂,浓度为2×。使用时,只需补加实验所需的引物和模板后即可进行PCR反应,可最大限度的减少人为误差,具有快速简便、稳定性好等优点。适用于常规PCR反应、复杂模板(如GC含量高,有二级结构)的扩增以及大规模基因检测。使用该产品得到的PCR扩增产物末端含有一个A碱基,可以直接用于TA克隆。
● 质量控制:
经检测无外源核酸酶活性;PCR方法检测无宿主残余基因组DNA;能有效地扩增人基因组中的单拷贝基因。
● 使用说明:
1. 冰浴中彻底融化2×MasterMix,混匀后Minispin将溶液收集到管底。
2. 按照下表在0.2ml PCR管中制备反应体系:
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50μl反应体系
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终浓度
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2×MasterMix
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25μl
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1×
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上游引物 10μM
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1-5μl
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0.2-0.8
μM
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下游引物 10μM
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1-5μl
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0.2-0.8
μM
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模板
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× μl
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10pg-1μg
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水
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补至50μl
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3. 快甩离心将反应液收集到管底。
4. PCR仪如果没有热盖加热的话,补加25μl矿物油。
5. PCR仪上执行以下程序:
步骤
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温度
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时间
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循环数
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初始变性
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94℃
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5 min
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1
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变性
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94℃
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30 sec
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25-40*
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退火
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Tm-5℃*
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30 sec
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延伸
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72℃
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1 min/kb
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最后延伸
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72℃
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5 min
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1
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*注: PCR 反应条件视模板、引物等的结构条件不同而各异。在实际操作中需根据模板、目的片段的大小、碱基序列和引物的长短等具体情况,设定最佳的反应条件(温度、时间等)。
6. 电泳检测。
注:使用含染料的2×MasterMix可以直接上样;不含染料的2×MasterMix要与6×loading buffer混合后上样。
实验示例: