类囊体膜增溶缓冲液
类囊体膜增溶缓冲液配制:
将2.5 ml增溶缓冲液(2×)全部加入到增溶剂粉末中,加入灭菌水定容至5 ml,彻底混匀,即配成5 ml增溶缓冲液,适量分装,-20℃贮存,尽量避免反复冻融。
1.9.1 取50 μl(浓度为1 mg Chl/ml)类囊体膜样品, 4℃ 16000 g离心5分钟,弃上清。
1.9.2 沉淀中加入50 μl类囊体膜增溶缓冲液重悬样品(此时样品浓度为1 mg Chl/ml),轻柔混匀,避免产生大量气泡,冰浴10 min; 4℃ 16000 g离心15 min;上清为绿色,有微量沉淀。 注:如上清为无色,说明增溶不好。
1.9.3 取上清移至新管中(大约可以取到45 μl上清),加入1/10体积的类囊体膜上样缓冲液,BN-PAGE 3-12%或4-16%梯度胶电泳(货号:RTD6139-0312或RTD6139-0416),上样体积5-15 μl。