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SYBR Green核酸染料(10000× in DMSO，电泳级)

●  产品规格：

● 简介：

SYBR Green是高灵敏的DNA荧光染料，适用于各种电泳分析，操作简单，至少可检出20 pg DNA，高于EB染色法25-100倍。SYBR Green 与dsDNA 结合荧光信号会增强800-1000倍，用SYBR Green染色的凝胶样品荧光信号强，背景信号低，可适用于多种电泳分析。

SYBR Green适合于多种凝胶电泳方法：琼脂糖凝胶，聚丙烯酰胺凝胶电泳，脉冲电场凝胶电泳以及毛细管电泳等。SYBR Green与双链DNA的亲和力非常高，因此可以用做电泳前染色，对分子生物学中常用的酶（如：Taq 酶、逆转录酶、内切酶、T4连接酶等）没有抑制作用。另外，SYBR Green与EB相比，诱变能力大大降低。

● 贮存：4℃，避光保存。

●  SYBR Green使用方法：

注意：染料使用前应在室温下彻底融化混匀后使用。

SYBR Green后染方法（推荐方法）

1. 制作不含染料的凝胶，按照常规方法进行电泳。

2. 用pH 7.0 - 8.5 的缓冲液（如：TAE，TBE 或 TE），按照10000：1的比例稀释SYBR Green浓缩液（如50ml 1×TAE中加入5μl 染料），混匀，制成染色溶液。

3. 将染色溶液倒入合适的聚丙烯容器中，放入凝胶，用铝箔盖住容器使染料避光。室温振荡染色10-30分钟，染色时间因凝胶浓度和厚度而定。聚丙烯酰胺凝胶直接在玻璃平皿上染色，将配好的工作溶液轻轻地倒在胶板上，让工作液均匀地覆盖整个胶板，并染色30分钟。玻璃平皿必须预先经过硅烷化溶液处理（避免染料吸附在玻璃表面上）。

4. 紫外灯下观测。

SYBR Green预染方法

1. 制胶：按常规方法制备凝胶，凝胶温度降至60℃左右时加入10000×SYBR，使染料终浓度为1×，如40ml凝胶溶液中加入4μl染料。

2. 上样、电泳后紫外灯下观察。

● SYBR Green使用注意事项

1．后染方法是推荐方法，能得到更好的电泳结果；由于SYBR对样品过量非常敏感，预染方法容易出现条带扭曲变形（建议泳道中每条带的含量不要超过5ng），请根据实际情况摸索出适合自己的实验程序，

2. SRBR对电泳缓冲液的pH要求严格，有效pH为7.5-8.0，电泳时尽量使用新鲜配制的缓冲液，并保证合适的pH范围。

3. SYBR Green 对玻璃和非聚丙烯材料具有一定亲合力。建议在稀释、贮存、染色等使用过程中用聚丙烯类容器。

4. 使用酒精沉淀核酸中，SYBR Green可以全部从双链核酸上去掉。

5. 如果想对用 SYBR Green染过的胶进行 Southern blot，建议在预杂交和杂交溶液中加入 0.1%- 0.3% 的SDS，可以有效去除SYBR。