台盼蓝染色液（Trypan Blue Staining Solution）

●     产品组成：

● 产品简介：

台盼蓝（Trypan Blue)或称台盼兰、锥虫蓝，是细胞活性染料，常用于检测细胞膜的完整性与细胞的存活率，是组织和细胞培养中最常用的死细胞鉴定染色方法之一。正常的活细胞细胞膜结构完整，能够排斥台盼蓝，细胞不会被染成蓝色；而丧失活性或细胞膜不完整的细胞可被台盼蓝染成蓝色。台盼蓝可被巨噬细胞吞噬，故可用于巨噬细胞的活体染色剂。凋亡小体也有台盼蓝拒染现象，因此台盼蓝溶液不能区分凋亡细胞和死亡细胞。台盼蓝染色后，通过显微镜下直接计数或显微镜下拍照后计数，就可以对细胞存活率进行比较精确的定量。染色时间只需 3-5 分钟，操作简单。

● 贮存：

4℃保存，一年有效。

● 操作步骤：

1.收集细胞：

对于贴壁细胞先用胰酶消化液消化细胞，用适量细胞重悬液（Hank’s液或生理盐水）重悬细胞；对于悬浮细胞，1000-2000g离心1分钟收集细胞，弃上清，用适量细胞重悬液重悬细胞。

2.台盼蓝染色：

吸取100微升重悬的细胞到1.5 ml离心管内，加入100微升台盼蓝染色液，轻轻混匀，染色3分钟  (染色3分钟时间已经足够，但染色时间可以更长一些，但不宜超过10分钟)。

3.计数：

  吸取少量经过染色的细胞，用血细胞计数板计数。通常如果要比较精确地进行定量，每个细胞样品至少数500个细胞，数出蓝色细胞和细胞总数。

细胞存活率＝(细胞总数－蓝色细胞数)/细胞总数×100%

● 注意事项：

1. 染色时间不能太长，否则活细胞也会逐渐积累染料而染成颜色，使检测结果偏低。

2. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

实验示例：

Jurkat细胞台盼蓝染色结果，深蓝色细胞为死细胞