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RealPAGE凝胶蛋白电泳试剂盒
 产品货号: RTD6126
 产品名称: RealPAGE凝胶蛋白电泳试剂盒
 产品价格/规格: 10板胶/50板胶 100元/400元
 产品说明书: 点击查看
 更新时间: 2018-03-29
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  • RealPAGE凝胶蛋白电泳试剂盒

    RealPAGE Gel Protein Electrophoresis Kit

    ●    产品货号及规格:

    货号

    名称

    组份货号

    组份名称

    规格

    RTD6126-10

    (10板胶)

    RTD6126-0508-01

    8% RealPAGE凝胶预混液

    RTD6126-05-01

    5%浓缩胶预混液

    15 ml*

    RTD6126-08-01

    8%分离胶预混液

    50 ml*

    RTD6126-0510-01

    10% RealPAGE凝胶预混液

    RTD6126-05-01

    5%浓缩胶预混液

    15 ml

    RTD6126-10-01

    10%分离胶预混液

    50 ml

    RTD6126-0512-01

    12% RealPAGE凝胶预混液

    RTD6126-05-01

    5%浓缩胶预混液

    15 ml

    RTD6126-12-01

    12%分离胶预混液

    50 ml

    RTD6126-0515-01

    15% RealPAGE凝胶预混液

    RTD6126-05-01

    5%浓缩胶预混液

    15 ml

    RTD6126-15-01

    15%分离胶预混液

    50 ml

    TM1230-03

    10×Tris-MOPS-SDS缓冲液

    500 ml (干粉)

    10% APS/TEMED

    5ml/0.5ml

    xg

    RTD6126-50

    (50板胶)

    RTD6126-0508-02

    8% RealPAGE凝胶预混液

    RTD6126-05-02

    5%浓缩胶预混液

    80 ml*

    RTD6126-08-02

    8%分离胶预混液

    250 ml*

    RTD6126-0510-02

    10% RealPAGE凝胶预混液

    RTD6126-05-02

    5%浓缩胶预混液

    80 ml

    RTD6126-10-02

    10%分离胶预混液

    250 ml

    RTD6126-0512-02

    12% RealPAGE凝胶预混液

    RTD6126-05-02

    5%浓缩胶预混液

    80 ml

    RTD6126-12-02

    12%分离胶预混液

    250 ml

    RTD6126-0515-02

    15% RealPAGE凝胶预混液

    RTD6126-05-02

    5%浓缩胶预混液

    80 ml

    RTD6126-15-02

    15%分离胶预混液

    250 ml

    TM1230-02

    10×Tris-MOPS-SDS缓冲液

    2×1(干粉)

    10% APS/TEMED

    5ml/0.5ml

    xg

    * 制备一块1 mm8cm×8cm凝胶需要分离胶预混液约4.5 ml,浓缩胶预混液约1.5 ml。

    RTD6126-10每套溶液可以配制至少10板凝胶; RTD6126-50每套溶液可以配制至少50板凝胶;

    产品简介:

    该产品利用聚丙烯酰胺凝胶电泳原理,采用合理设计的预混合配方和配制流程,可在20-30分钟内配制得到高质量的聚丙烯酰胺凝胶,用于变性和非变性蛋白凝胶电泳。本产品提供四种常用分离胶浓度8%、10%、12%和15%,可以满足绝大多数蛋白电泳需求。

    特点:

    1. 方便:分离胶和浓缩胶的制备只需用预混液加上APS和TEMED即可;

    2. 快速:20-30分钟内即可制备好凝胶。

    3. 安全:预混液,不用接触有毒粉末。

    4. 稳定:独特pH中性预混液配方,凝胶4℃稳定贮存一年。

    贮存: 4贮存。有效期一年。

    使用说明:

      凝胶制备:

    以下程序以制备一块1 mm厚,大小8cm×8cm凝胶为例,实际操作按照使用胶板规格调整试剂用量。

    1.参照凝胶模具说明书,装配好凝胶模具。

    2. 根据下表参考选择合适的凝胶浓度

    不同浓度的SDS-PAGE分离胶的最佳分离范围

    SDS-PAGE分离胶浓度

    最佳分离范围

    8%

    30-90kD

    10%

    20-80kD

    12%

    12-60kD

    15%

    10-40kD

    3.分离胶配制:

    参照下表,在凝胶模具中灌入分离胶溶液(凝胶液加至距前玻璃板顶端约1.5 cm或距梳齿约0.5 cm即可),然后在分离胶溶液上轻轻覆盖一层1-2 cm的水层,使凝胶表面保持平整;静置10-15分钟(25℃),待分离胶和水层之间出现一个清晰的界面后,说明凝胶已聚合;去除覆盖在分离胶上的水层。

    分离胶配制

    浓缩胶配制

    分离胶预混液

    4.5 ml

    /

    5%浓缩胶预混液

    /

    1.5 ml

    TEMED

    4.5 μl

    1.5 μl

    10% APS

    45 μl

    15 μl

    4.浓缩胶配制:

    将浓缩胶溶液加至分离胶的上面,直至凝胶溶液到达前玻璃板的顶端;将梳子插入凝胶内,避免产生气泡;静置15-20分钟(25℃),等待浓缩胶聚合。

    注:凝胶的聚合时间与环境温度有关。夏天温度较高时,聚合较快;冬天气温低时,聚合时间会延长。可以根据环境温度的不同调节APS的加入量。

      电泳:

    1. Tris-MOPS-SDS电泳缓冲液配制:

    10×Tris-MOPS-SDS缓冲液 溶液型 配制方法:

    货号

    10×Tris-MOPS-SDS缓冲液

    干粉型

    10×Tris-MOPS-SDS缓冲液

    溶液型 配制量

    TM1230-03

    500ml 干粉

    加超纯水,彻底溶解后定容至 500 ml

    TM1230-02

    1 干粉

    加超纯水,彻底溶解后定容至 1000 ml

    注: = 1 \* GB3 10×Tris-MOPS-SDS缓冲液溶液 4避光贮存,如溶液变黄,表明试剂失效,不能使用。

    = 2 \* GB3 本产品提供10×Tris-MOPS-SDS电泳缓冲液,适用于变性蛋白电泳。如要进行非变性电泳,请自行配制不含SDSTris-MOPS电泳缓冲液(见缓冲液配方)


    电泳前,按照下表配制1×Tris-MOPS-SDS缓冲液

    1×Tris-MOPS-SDS缓冲液配制量

    400 ml

    1000 ml

    10×Tris-MOPS-SDS缓冲液

    40 ml

    100 ml

    超纯水

    360 ml

    900 ml

    注:400 ml 1×Tris-MOPS-SDS缓冲液可以完成一次电泳。

    2. 凝胶凝固好后,上样,电泳。

    电泳条件

    电泳缓冲液

    稳压电泳

    起始电流

    (一板胶)

    结束电流

    (一板胶)

    电泳时间

    1×Tris-MOPS-SDS缓冲液

    140 V

    90-120 mA

    30-45 mA

    45-70分钟

    注: = 1 \* GB3 本产品使用Tris-MOPS-SDS缓冲液或Tris-MES-SDS缓冲液,不适合用Tris-甘氨酸-SDS缓冲液电泳

        = 2 \* GB3 1×Tris-MOPS-SDS缓冲液可以回收利用2-3次。

    三  缓冲液配方:

    1  10x Tris-MOPS-SDS缓冲液 (1 L)    (Cat No: TM1230-02) 

    组分浓度:0.5 MTris,0.5 MMOPS, 1% SDS,10mMEDTA 2Na,50mMNaHSO3

    Tris base 60.6 g

    MOPS   104.6 g

    SDS        10 g

    EDTA Na      3 g

    NaHSO3    5.2 g

    用灭菌ddH2O定容至1 升

    Do not adjust the pH (~pH 7.7)

    2  10x Tris-MOPS缓冲液 (1 L)    (Cat No: TM1240-02) 

    组分浓度:0.5 MTris,0.5 MMOPS,10mMEDTA 2Na

    Tris base 60.6 g

    MOPS   104.6 g

    EDTA Na      3 g

    用灭菌ddH2O定容至1 升

    Do not adjust the pH (~pH 7.7)

     


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