Aureobasidin A Solution
金担子素A溶液 1mg/ml
● 产品包装：
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产品编号
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产品名称
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产品包装
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说明书
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AU0113S-01
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金担子素A溶液(1mg/ml)
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1ml
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1份
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AU0113S-02
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金担子素A溶液(1mg/ml)
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5×1ml
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1份
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AU0113S-03
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金担子素A溶液(1mg/ml)
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10×1ml
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1份
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● 贮存、运输及效期：
-20℃贮存；湿冰运输；有效期一年。
● 产品参数:
外观: 无色清晰甲醇溶液。
除菌方式：过滤除菌。
浓度：1mg/ml 甲醇溶液。
● 产品介绍：
一、关于AbA：
金担子素A（Aureobasidin A，AbA）是从丝状真菌Aureobasidium pullulans No. R106中分离出来的环酯肽类抗生素，具有很强的抗真菌能力。AbA作用机制是抑制酵母中AUR1基因编码的肌醇磷酰胺（inositol phosphorylceramide，IPC）合成酶的活性，干扰鞘脂合成，从而杀死菌株。AbA在较低的浓度下（0.1-0.5 μg/ml）即可对酵母产生毒性。编码IPC合成酶的基因研究较多的来自酿酒酵母菌的AUR1基因，以及构巢曲霉的AURA基因，两者具有同源性。通过对编码AUR1-C基因进行突变即可使得菌株对AbA产生抗性，作为蛋白质互作研究的报告基因。
因为AbA可以直接杀死敏感的酵母菌株，而不是延迟菌株生长，所以AbA筛选有利于阳性克隆的生长和识别。与营养报告基因（如HIS3）进行低严紧度初筛相比，AbA筛选大大消除了背景克隆。实际操作中，用AbA进行初筛时会获得更多克隆，之后再用4个报告子(AUR1-C,HIS3, ADE2 和MEL1)进行高严紧度的二次筛选以验证阳性克隆。AbA非常适合用作阳性克隆子筛选用的药物选择性标记；也是酵母单/双杂交研究中理想的报告子，可以简化酵母双杂交文库筛选。
二、使用方法：
1.本品为AbA的甲醇溶液，浓度为1 mg/ml，直接用作储存液。
2.灭菌后YPD Agar培养基冷却至50-55 ℃，加入适量的AbA储液，倒板备用。（AbA工作浓度取决于宿主细胞的敏感度，见下表）
3.制备酵母感受态细胞并完成转化。
4.把100 μl完成转化酵母细胞悬液涂到含有适量AbA的YPD Agar培养基平板上，30℃培养2-4天。
5.挑取克隆鉴定，或统计转化效率。
三、不同菌株建议AbA的工作浓度：
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菌株
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MIC（μg/ml）
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S.cerevisiae
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ATCC9763（diploid）
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0.2-0.4
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Baker’s yeast（diploid）
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0.2-0.4
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Beer yeast（triploid or tetraploid）
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0.1
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SH3328（haploid）
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0.1
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Shochu yeast（diploid）
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0.1
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Sake yeast（diploid）
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0.1-0.2
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C.albicans
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TIMM-0136（diploid）
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0.04
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C.tropicalis
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TIMM-0324（diploid）
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0.08
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Schizo.pombe
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JY-745（monoploid）
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0.1
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四、对AbA敏感的真菌：
出牙酵母（Saccharomyces cerevisiae）、粟酒裂殖酵母（Schizosaccharomyces pombe）、光滑念珠菌（Candida glabrata）、构巢曲霉（Aspergillus nidulans）和黑曲霉（A. niger.）。