胰酶细胞消化液(含酚红)
产品编号
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产品名称
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包装
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RT0220
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胰酶消化液(含酚红)
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100ml
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说明书
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一份
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● 产品简介:
胰酶细胞消化液(Trypsin-EDTA Solution)含0.25%胰酶(Trypsin)和0.02%EDTA,不含Ca2+和Mg2+,含酚红。该消化液已用0.22μm滤膜过滤除菌,可以直接用于培养细胞的消化,或者一些组织的消化。有EDTA的胰酶比不含EDTA的胰酶消化效果更好,但制备原代细胞一般不能用含EDTA的胰酶(否则不容易贴壁),用于流式细胞分析的也不能用含EDTA的胰酶(否则残留EDTA会将后续缓冲液中的Ca离子螯合)。
本胰酶细胞消化液具有方便快速的特点,通常室温消化1分钟左右就可以消化下大多数贴壁细胞。
● 保存条件:
低温运输,-20℃保存,有效期一年。
注:由于低温影响胰酶消化液的pH值,-20℃贮存下溶液有时会变成淡黄色,4℃融化后会转变为红色,这种颜色的变化不会影响胰酶的消化能力。
● 注意事项:
① 在使用胰酶细胞消化液的过程中要特别注意避免消化液被细菌污染。
② 胰酶细胞消化液消化细胞时间不宜过长,否则细胞铺板后生长状况会较差。
● 使用说明:
1. 贴壁细胞的消化:
a) 吸去培养液,用无菌的PBS、Hanks液或无血清培养液洗涤细胞一次,以去除残余的血清。
b) 加入少量胰酶细胞消化液,略盖过细胞即可,室温放置30秒至2分钟。
注:不同的细胞消化时间有所不同。
c) 显微镜下观察,细胞明显收缩,并且肉眼观察培养器皿底部发现细胞的形态发生明显的变化,或者用枪吹打细胞发现细胞刚好可以被吹打下来;此时吸除胰酶细胞消化液;加入含血清的完全细胞培养液,吹打下细胞,即可直接用于后续实验。
d) 如果发现消化不足,则加入胰酶细胞消化液重新消化。
e) 如果发现细胞消化时间过长,未及吹打细胞,细胞已经有部分直接从培养器皿底部脱落,直接用胰酶细胞培养液把细胞全部吹打下来。1000-2000g离心1分钟,沉淀细胞,尽量去除胰酶细胞消化液后,加入含血清的完全培养液重新悬浮细胞,即可用于后续实验。
2. 组织的消化:
不同的组织需要消化的时间相差很大,通常以消化后可以充分打散组织为宜。