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Real Taq DNA聚合酶

Real Taq DNA聚合酶

产品编号:RTC3102-03

产品规格:5×500U

相关规格:
数量
价格 ¥360

Real Taq DNA Polymerase

● 储存条件:-20 保存

● 浓    : 5 U/ml

产品简介

Real Taq DNA Polymerase是从克隆有Thermu aquaticus DNA Polymerase基因的大肠杆菌经诱导表达后分离纯化的,其分子量为94 KD具有5’-3’DNA聚合酶活性和5’-3’外切核酸酶活性,无3’-5’外切酶活性。在PCR反应中,Real Taq DNA Polymerase延伸速度为1-2 kb/分钟,产物3’端带A,可直接用TA载体克隆。

活性定义

1单位(U) Real Taq DNA Polymerase活力定义为在7430分钟内,以活性化的大马哈鱼精子DNA作为模板/引物,将10 nmol脱氧核苷酸掺入到酸不溶物质所需的酶量。

酶贮存缓冲液

20 mM Tris-HCl (pH 8.0);0.1 mMEDTA;1 mMDTT;100 mMKCl ; Stabilizers; 50% glycerol

10×Taq Buffer

200 mM Tris-HCl (pH 8.4);200 mMKCl;15 mMMgCl2; 其它成分。

适用范围

一般用于DNA片段的PCR扩增、DNA标记、引物延伸、序列测定、平末端加A等,产物可以直接用于T/A载体克隆。

反应举例:

注意:以下举例为常规PCR反应系统,仅供参考。实际反应条件因模板、引物等的结构不同而各异,需根据模板、目的片段的大小、碱基序列和引物长短等具体情况,设定最佳反应条件。

以人基因组DNA为模板,扩增1 kb的片段

1. 反应体系的建立:50 ml反应体系如下(可根据比例放大或缩小反应体系)

 

Template

<1mg

Primer 110 mM

1 ml

Primer 210 mM

1 ml

10×Taq Buffer

5 ml

dNTP Mixture(10 mM)

1 ml

Taq (5 U/ml)

0.5 ml

ddH2O

补至 50 ml

2.  PCR反应循环的设置:

94 3 min

94 30 sec

55 30 sec      30 cycles

72 1 min

72 5 min

3.  结果检测:反应结束后取5 ml反应产物,琼脂糖凝胶电泳检测。


 
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