2×Taq PCR MasterMix
● 产品包装:
|
目录号
|
包装
|
价格
|
2×MasterMix(不含染料)
|
RTC3103-02
|
500μl
|
60元
|
RTC3103-03
|
5×500μl
|
240元
|
2×MasterMix(含染料)
|
RTC3104-02
|
500μl
|
60元
|
RTC3104-03
|
5×500μl
|
240元
|
注:以50μl PCR反应体系为例,每次使用25μl 2×MasterMix,500μl可做20次 50μl PCR反应。
● 储存条件: -20℃可长期保存;4℃稳定贮存3个月。经常使用时,一旦融化后请4℃贮存,尽量避免反复冻融。
● 产品简介:
本产品包含Taq DNA聚合酶、dNTPs、MgCl2、反应缓冲液、PCR反应的增强剂和优化剂以及稳定剂,浓度为2×。使用时,只需补加实验所需的引物和模板后即可进行PCR反应,可最大限度的减少人为误差,具有快速简便、稳定性好等优点。适用于常规PCR反应、复杂模板(如GC含量高,有二级结构)的扩增以及大规模基因检测。使用该产品得到的PCR扩增产物末端含有一个A碱基,可以直接用于TA克隆。
● 质量控制:
经检测无外源核酸酶活性;PCR方法检测无宿主残余基因组DNA;能有效地扩增人基因组中的单拷贝基因。
● 使用说明:
1. 冰浴中彻底融化2×MasterMix,混匀后Minispin将溶液收集到管底。
2. 按照下表在0.2ml PCR管中制备反应体系:
|
50μl反应体系
|
终浓度
|
2×MasterMix
|
25μl
|
1×
|
上游引物 10μM
|
1-5μl
|
0.2-0.8 μM
|
下游引物 10μM
|
1-5μl
|
0.2-0.8 μM
|
模板
|
× μl
|
10pg-1μg
|
水
|
补至50μl
|
|
3. 快甩离心将反应液收集到管底。
4. PCR仪如果没有热盖加热的话,补加25μl矿物油。
5. PCR仪上执行以下程序:
步骤
|
温度
|
时间
|
循环数
|
初始变性
|
94℃
|
5 min
|
1
|
变性
|
94℃
|
30 sec
|
25-40*
|
退火
|
Tm-5℃*
|
30 sec
|
延伸
|
72℃
|
1 min/kb
|
最后延伸
|
72℃
|
5 min
|
1
|
*注: PCR 反应条件视模板、引物等的结构条件不同而各异。在实际操作中需根据模板、目的片段的大小、碱基序列和引物的长短等具体情况,设定最佳的反应条件(温度、时间等)。
产品示例:
2×Taq PCR MasterMix扩增效果比较
M III:RTM403 DNA Marker III
lane 1:Rice 5000 bp
lane 2:Ricie 3000 bp
lane 3: Rice 600 bp