2×pfu
PCR MasterMix
● 产品包装：
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目录号
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包装
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2×pfu PCR
MasterMix（不含染料）
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RTH3103-02
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500μl
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RTH3103-03
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5×500μl
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2×pfu PCR
MasterMix（含染料）
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RTH3104-02
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500μl
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RTH3104-03
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5×500μl
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注：以50μl PCR反应体系为例，每次使用25μl 2×MasterMix，500μl可做20次 50μl PCR反应。
● 储存条件: -20℃可长期保存；4℃稳定贮存3个月。经常使用时，一旦融化后请4℃贮存，尽量避免反复冻融。
● 产品简介：
本产品包含pfu DNA聚合酶、dNTPs、Mg2+、反应缓冲液、PCR反应的增强剂和优化剂以及稳定剂，浓度为2×。使用时，只需补加实验所需的引物和模板后即可进行PCR反应，可最大限度的减少人为误差，具有快速简便、稳定性好等优点。用于高保真的DNA片段的扩增。使用该产品得到的PCR扩增产物为平滑末端，不可以直接用于TA克隆，要通过平滑末端克隆法进行克隆。
● 质量控制：
以λ DNA为模板，可以很好扩增5kb的DNA片段；以水稻基因组为模板，可以很好扩增3.2kb的DNA片段。
● 使用说明：
1. 冰浴中彻底融化2×MasterMix，混匀后Minispin将溶液收集到管底。
2. 按照下表在0.2ml PCR管中制备反应体系：
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50μl反应体系
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终浓度
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2×MasterMix
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25μl
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1×
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上游引物 10μM
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1-5μl
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0.2-0.8
μM
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下游引物 10μM
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1-5μl
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0.2-0.8
μM
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模板
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× μl
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10pg-1μg
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水
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补至50μl
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3. 快甩离心将反应液收集到管底。
4. PCR仪如果没有热盖加热的话，补加25μl矿物油。
5. PCR仪上执行以下程序：
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步骤
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温度
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时间
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循环数
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初始变性
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94℃
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5 min
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1
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变性
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94℃
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30 sec
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25-40*
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退火
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Tm-5℃*
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30 sec
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延伸
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72℃
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0.5kb/min
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最后延伸
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72℃
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5 min
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1
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*注： PCR 反应条件视模板、引物等的结构条件不同而各异。在实际操作中需根据模板、目的片段的大小、碱基序列和引物的长短等具体情况，设定最佳的反应条件（温度、时间等）。
6. 电泳检测。
注：使用含染料的2×MasterMix可以直接上样；不含染料的2×MasterMix要与6×loading buffer混合后上样。
1% agarose gel,RealSafe Red stain
lane 1: 1800bp,Rice fragement
lane 2: 1000bp, plasmid fragement
lane 3: 500bp, plasmid fragement