RealPAGE TBE-PAGE核酸非变性电泳预制胶
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名称
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规格
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RealPAGE TBE-PAGE核酸非变性电泳预制胶（12孔）
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10板/盒
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● 产品介绍：
RealPAGE TBE-PAGE核酸非变性电泳预制胶适用于20-2,000 bp双链DNA或20-2,000 nt单链DNA的核酸电泳，适合用于 DNA电泳应用领域，包括分析限制性酶切、PCR产物、DNA印迹分析和引物分析。是一款安全、快捷、高性能的预制凝胶，即开即用无需自行配置各种试剂及灌胶操作，核酸条带均一性好，分辨率高。兼容市场上主流的 mini 电泳槽， 如 Bio-Rad，天能，六一和君意东方等。
产品参数：
预制胶板尺寸：长10 cm，宽8.2 cm，厚度为4 mm
预制胶尺寸：长 8.2 cm，宽 7.2 cm，厚度为1.1 mm
梳孔：12 孔
包装规格：10板/盒
最大上样量：30 μl（12 孔）
● 产品货号及选择：
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货号
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分离胶浓度
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孔数
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最大上样量
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电泳缓冲液
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最佳分离范围
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溴酚蓝位置
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RTH5101-0005
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5%
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12
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30 μl
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1×TBE
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200-2000 bp
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~70 nt
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RTH5101-0010
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10%
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12
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30 μl
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1×TBE
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50-1500 bp
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~35 nt
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RTH5101-0015
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15%
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12
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30 μl
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1×TBE
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20-1000 bp
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~20 nt
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● 贮存、效期及运输：
预制胶4-8℃贮存，切勿置于0oC以下冷冻；有效期30天；常温运输。
● 使用说明：
一. 样品准备：
1.1 DNA样品按照5：1体积加入6×非变性PAGE DNA上样缓冲液（货号：DL070），混匀后上样。 建议每孔上样0.2-0.5 μg左右即可。
1.2 TBE- PAGE非变性电泳双链DNA Marker可以选择10 bp DNA ladder（10-100 bp）（货号：RTM443）或20 bp DNA ladder（20-500 bp）（货号：RTM441）或25 bp DNA ladder（25-500bp）（货号：RTM444）作为分子量标准；单链DNA Marker可以选择单链DNA Marker（20-75 nt）非预混型（货号：RTM507）或单链DNA Marker（10-75 nt）非预混型（货号：RTM509）。
二. 电泳液的准备：
取 5×TBE（货号：TB001），加入去离子水稀释为1×，制备成1×TBE buffer或自行配制1×TBE。1×TBE电泳缓冲液配制方法：
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终浓度
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顺序
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原料
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1升
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5 升
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89 mM
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1
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Tris碱 [MW121.14]
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10.8 克
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54克
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2 mM
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2
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EDTA 2Na·2H2O [MW372.24]
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0.744 克
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3.72克
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89 MM
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3
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硼酸 [MW61.83]
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5.5 克
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27.5克
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4
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超纯水最后定容至
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1 升
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5 升
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最后pH在8.2-8.3之间，可以不用调节pH，记录每批pH
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三. 电泳：
3.1 将预制胶从包装袋中取出，装入兼容的电泳槽中，加入电泳缓冲液，再缓慢地将梳子拔出。
注：伯乐Mini III或Mini-PROTEAN Tetra Cell，天能VE-180，六一24K系列电泳槽请确保密封条的安装方向（如图）。六一其他系列，君意东方JY-SCZ2/4，百晶BG-verMINI，Hoefer Mighty Small (SE 250/ SE 260/ SE 280)等电泳槽可以直接使用预制胶。不兼容Thermol系列电泳槽。
3.2内槽加满电泳液，外槽加入电泳液没过电泳槽底部的阳极即可，用1×TBE缓冲液彻底冲洗加样孔2-3次。
3.3 上样：在梳孔内加入适当浓度和体积的样品。建议每孔上样0.2-0.5 μg左右即可。
注：最佳上样量须通过实验来确定，样品过量较易导致条带拖尾。
3.4 将电泳槽盖子盖好，并将电源线插头插入电泳仪电源插孔(红对红，黑对黑)。一般在150V电压，电泳50-90分钟，根据溴酚蓝的位置大体判断条带大小位置，停止电泳。
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恒电压
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起始电流
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结束电流
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电泳时间
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适用条件
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推荐电压
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150V
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15-20 mA/板胶
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5-10 mA/板胶
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60+ min
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最佳电压，最优的分辨率
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非变性胶浓度
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溴酚蓝
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二甲苯菁
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5%
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~70 nt
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~250 nt
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10%
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~35 nt
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~120 nt
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15%
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~20 nt
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~75 nt
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3.5 取出玻璃胶板，稍加用力慢慢扳开或用刮板轻轻撬开玻璃胶板，将凝胶取出。
四. 染色：
使用核酸染料染色，RealSafe Red（货号：GR002）或RealSafe All（货号：GR004）核酸染料结合核酸效果最佳，强烈建议使用以便获得最佳效果的胶图。
以下程序用RealSafe Red核酸染料(货号:GR002)进行染色。
4.1 漂洗：拆下凝胶后，适量蒸馏水漂洗3-5分钟。
4.2 染色液配制：
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即用型RealSafe Red核酸染色液配制
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1×TBE
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RealSafe Red核酸染料
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10-20 μl
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4.3 染色：
凝胶浸泡于即用型染色液中，常温避光摇床40-60 rpm 染色30 分钟。
4.4 观察：
紫外灯或蓝光仪上观察条带。
迁移示意图：
● 实验示例：
