精准定量1kb DNA Ladder

● 产品编号及规格：

    RTM417-02       100T(2×250μl)

● 产品简介：

    本产品是由8条带状双链DNA条带组成，适用于琼脂糖凝胶电泳中DNA条带的分析。

本产品为即用型产品，已含有1×loading buffer，可根据实验需要，直接取2-5μl电泳，使用方便，电泳图像清晰。本产品中8条带分为1000（50 ng/5 μl），2000（50 ng/5 μl），3000（50 ng/5 μl），4000（100 ng/5 μl），5000（50 ng/5 μl），6000（50 ng/5 μl），8000（50 ng/5 μl），10000bp（50 ng/5 μl）。其中4000bp条带加亮显示。

● 储存及运输：

4℃贮存3个月， -20℃长期贮存；常温运输。

● 使用方法：

1. 取2-5μl本产品加入到琼脂糖凝胶的加样孔中（每1mm×1mm加样孔加1μl，如果加样孔宽于5mm，可以适当增加上样量）就行电泳。

2. 建议电泳条件:凝胶浓度为0.8-1.0％，凝胶长度10 cm，电泳电压~7v/cm，电泳时间60+分钟。

3. 通过核酸染料染色后紫外灯或蓝光仪下观察条带。

● 注意事项：

1. 琼脂糖的质量对DNA的电泳有很大影响，电泳时请尽量使用质量优等的琼脂糖。由于PAGE电泳的特殊性，该产品不建议用于PAGE电泳。

2. 使用与电泳缓冲液一致的缓冲液融化琼脂糖，例如使用1×TAE缓冲液电泳，需使用1×TAE缓冲液溶胶。

3. 多次电泳后缓冲液电导增强，相同电压下电流增大，导致分辨率降低，并且明显产热，严重时会引起凝胶熔化或DNA变性。

4. 推荐使用RealSafe系列染料（货号：GR002，GR003，GR004）染色。如果使用Goldview或EB等染料进行染色，由于此类染料带更多的正电荷（染料移动方向与核酸泳动方向相反），随着电泳时间延长，染料向大片段聚集，凝胶会出现阴阳胶现象（染料含量高的凝胶紫外下较亮，含量低的凝胶紫外下发暗），导致小分子量DNA显色很弱或不可见。阴阳胶可以在电泳结束后浸泡染色，将胶浸没在含1 μg /ml EB或Goldview的电泳缓冲液中20-25 min，小分子量DNA会显色清楚。更长时间浸泡会因DNA分子扩散而使条带弥散，小分子量DNA更易弥散。

5. 紫外照射下EB易分解，使DNA条带荧光变浅。DNA受紫外光照射形成嘧啶二聚体，不利于待回收片段的下游工作，因此尽可能减少紫外照射时间。

6. 蔗糖会结合DNA，降低其电泳迁移率，建议DNA样品上样使用含甘油的Loading Buffer。

7. 大部分核酸工具酶会结合DNA，降低其电泳迁移率，大分子量DNA尤为明显。

● 实验示例：

● 附录：

DNA在琼脂糖凝胶中的有效分离范围

使用RTM417  1kb DNA ladder产品发表部分文章列表：

1. [2023 IF=4.9] Degradation of Natural Undaria pinnatifida into Unsaturated Guluronic Acid Oligosaccharides by a Single Alginate Lyase.

Marker :RTM417，1kb DNA ladder

Author: Hui Wang, Jiaqi Wen, Nuraliya Ablimit, Kun Deng, Wenzhuo Wang and Wei Jiang

Journal: Marine Drugs 2024, 22,453.

Institution：College of Biological Sciences, China Agricultural University

Paper link：https://doi.org/10.3390/md22100453