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琼脂糖凝胶DNA回收试剂盒

琼脂糖凝胶DNA回收试剂盒

产品编号:RTP2201-02

产品规格:100次

相关规格:
数量
价格 ¥240

琼脂糖凝胶DNA回收试剂盒

试剂盒内容:

试剂盒组成

RTP2201-02 100次)

RTP2201-03200次)

溶胶液PN

100 ml

2×100 ml

3 M NaAc pH5.2

500μl

500μl

漂洗液PW

25 ml

2×25 ml

洗脱缓冲液EB

15 ml

15 ml

吸附柱CA1

100

2×100

收集管(2 ml

100

2×100

说明书

1

1

储存条件:

本试剂盒在室温(15–25℃)干燥条件下,可保存12个月;更长时间的保存可置于2–8℃。(注意:当低温贮存时,使用前应先将试剂盒内的溶液在室温中放置一段时间,必要时可在37℃水浴中预热10-20分钟,以平衡溶液温度。)

产品简介:

本试剂盒采用可以高效、专一结合DNA的硅基质材料和独特的缓冲液系统,从TAE或TBE琼脂糖凝胶上回收DNA片段,同时去除蛋白质、其它有机化合物、无机盐离子及寡核苷酸引物等杂质。可回收100 bp–40 kb大小的片段,回收率大于80%(<100 bp 和>10kb 的DNA片段回收率为30-50 %)。

每个吸附柱每次最多可吸附的DNA量约为20 μg。

使用本试剂盒回收的DNA可适用于各种常规操作,包括酶切、PCR、测序、文库筛选、连接和转化等实验。

 

产品特点:

1 溶胶液PN为亮黄色,便于观察胶是否彻底融化和溶胶体系的pH是否合适。

2 操作快捷,单个样品操作少于15分钟。

 

注意事项:请务必在使用本试剂盒之前阅读此注意事项。

1 电泳时最好换用新鲜的电泳缓冲液,以免影响电泳和回收效果;如有可能,尽量使用TAE系统,因为有研究指出使用TBE系统后,回收产物中的痕量硼酸会影响后续的酶切反应。

2 切胶时,紫外照射时间应尽量短,以免对DNA造成损伤;请尽量去除不含目的片段的琼脂糖凝胶,这将会对融胶很有帮助。

3 第一次使用前请按照标签说明在漂洗液PW中加入无水乙醇,并做好标记,用完后紧拧瓶盖。


 

操作步骤:

如非指出,所有离心步骤均为使用台式离心机在室温下离心。

1 将单一的目的DNA条带从琼脂糖凝胶中切下(尽量切除多余部分)放入干净的离心管中,称取重量。

2 向胶块中加入3倍体积溶胶液PN (如果凝胶重为100mg,其体积可视为100 μl,则加入300 μl溶胶液),55℃水浴放置10分钟,其间不断温和地上下翻转离心管,以确保胶块充分溶解。

注意:

  如果此时溶胶液变为粉红色,请加入少量3MNaAc pH5.2(一般说来,10μl足矣),使溶胶液变为黄色再上柱离心。

 ② 对于高浓度的凝胶(>2%),按照100mg凝胶加入100μl灭菌水和600μl溶胶液PN的比例加入溶胶液PN。

  胶块完全溶解后最好将胶溶液温度降至室温再上柱,因为吸附柱在较高温度时结合DNA的能力较弱。

3 可选步骤:当目的片段<500bp时,如想提高回收效率,向溶胶体系种加入1/3溶胶液PN体积的异丙醇(如使用300μl溶胶液,则加入100μl异丙醇),混匀,55℃温浴1分钟后再进行步骤4。当目的片段>500bp时,省略此步骤,直接进行步骤4。

4 将上一步所得溶液加入到吸附柱CA1中(吸附柱放入收集管中),室温放置2分钟,13,000 rpm离心60秒,倒掉收集管中的废液,将吸附柱重新放入收集管中。

注意:

1 吸附柱CA的有效容积为700μl,如溶胶体系体积大于700μl,分次上柱,保证全部溶液都加到吸附柱中。

2 <100bp>10kb的片段请在室温放置10分钟,这将会提高回收效率。

5 向吸附柱中加入700μl漂洗液PW(使用前请先检查是否已加入无水乙醇),13,000 rpm离心60秒,倒掉废液,将吸附柱重新放入收集管中。

6 向吸附柱中加入500μl漂洗液PW,13,000 rpm离心30-60秒,倒掉废液。

7 将离心吸附柱CA1放回收集管中,13,000 rpm离心2分钟,尽量除去漂洗液。

注意:此步必不可少!如果漂洗液有残留会影响回收效率和DNA质量,进而影响下游实验;离心后将吸附柱盖子打开,室温放置2分钟,这样将有助于彻底挥发残余乙醇。

8 将吸附柱放到一个干净离心管中,向吸附膜中间位置悬空滴加适量洗脱缓冲液EB(一般不要少于30μl),室温放置2分钟。13,000 rpm离心1分钟收集DNA溶液。

注意:

1可将洗脱缓冲液EB预热到70后再加到吸附膜上,这样可以提高洗脱效率。

2 CA1柱的洗脱体积不应少于30 μl,体积过小将会降低回收效率。

3洗脱液的pH值对于洗脱效率有很大影响。若用水做洗脱液应保证其pH值在7.0-8.5范围内,pH值低于7.0会降低洗脱效率

9 DNA产物-20℃保存。

 

RTP2201 琼脂糖凝胶DNA回收试剂盒发表文章

1. [2008 IF=1.749] Development of a sequence-characterized ampli?ed region marker for diagnosis of dwarf bunt of wheat and detection of Tilletia controversa Kuhn.

Author: J.H. Liu, L. Gao, T.G. Liu and W.Q. Chen

Product: RTP2201 琼脂糖凝胶回收试剂盒

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2. [2009 IF=2.435] Characterization of three new S-alleles and development of an S-allele-specific PCR system for rapidly identifying the S-genotype in apple cultivars.

Author: Shenshan Long, Maofu Li, Zhenhai Han, Kun Wang, Tianzhong Li

Product: RTP2201琼脂糖凝胶回收试剂盒

Journal: Tree Genetics & Genomes (2010) 6:161–168

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Paper link https://link.springer.com/article/10.1007/s11295-009-0237-6

 

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Author: Li Gao,Wanquan Chen and Taiguo Liu

Product: RTP2201 琼脂糖凝胶回收试剂盒

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4. [2010 IF=1.359] Curing the Plasmid pXO2 from Bacillus anthracis A16 Using Plasmid Incompatibility.

Author: Huagui Wang, Xiankai Liu, Erling Feng, Li Zhu, Dongshu Wang, Xiangru Liao, Hengliang Wang

Product: RTP2201 琼脂糖凝胶回收试剂盒

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Author: Hongru Wang, Jun Fang, Chengzheng Liang, Minghui He, Qiye Li, and Chengcai Chu

Product: RTP2201 琼脂糖凝胶回收试剂盒

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Product: RTP2201 琼脂糖凝胶回收试剂盒

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Paper linkhttps://link.springer.com/article/10.1007/s12010-014-1228-0

 

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Author: Yakai Tian, Yingping Qu,Kun Dong,Shaoyu He,Wu Jie, and Jiaxing Huang

Product: RTP2201 琼脂糖凝胶回收试剂盒

Journal: Journal of Insect Science (2021) 21(5): 13; 1–8

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8. [2022 IF= 1.7] VvAGAMOUS Affect Development of Four Different Grape Species Ovary.

Author: Pengfei Zhang, Yuqin Zhang1, Qifeng Zhao, Tiequan Niu, Pengfei Wen and Jinjun Liang

Product: RTP2201 琼脂糖凝胶回收试剂盒

Journal: Phyton-International Journal of Experimental Botany (2023) , vol.92, no.4

InstitutionCollege of Horticulture, Shanxi Agricultural University

Paper linkhttps://doi.org/10.32604/phyton.2023.026227

 


 
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