Taq plus DNA Polymerase
高效率、高保真DNA聚合酶
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目录号
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浓度
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包装
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RTS3102-02
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5 U/μl
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500 U （100μl）
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RTS3102-03
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5 U/μl
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5×500 U（5×100μl）
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● 贮存
-20℃保存一年。
● 产品简介
Taq
plus DNA Polymerase是由pfu DNA Polymerase和Taq DNA聚合酶按照一定的比例混合而成，具有扩增效率高，错配率低的特点。与Taq DNA聚合酶相比，Taq
plus DNA聚合酶具有扩增长度长，保真性好的优点；与pfu
DNA聚合酶相比，具有扩增速度快，反应效率高的优点。此酶具有比Taq
DNA聚合酶约3倍的PCR可信度。该酶的大多数PCR产物3’端带碱基A，可以通过TA克隆法进行克隆。
● 产品组成（RTS3102-02）
Taq plus DNA Polymerase（5U/μl） 100μl
10×Taq plus PCR
buffer（含Mg2＋） 1ml
● 活性定义
1单位(U)
Taq plus DNA Polymerase活力定义为在74℃、30分钟内，以活性化的大马哈鱼精子DNA作为模板/引物，将10
nmol脱氧核苷酸掺入到酸不溶物质所需的酶量。
● 酶贮存缓冲液
50 mM Tris-HCl (pH 8.0);0.1
mMEDTA;1 mMDTT;50 mMKCl ;
Stabilizers; 50% glycerol
● 适用范围
适用于要求保真性和高效率的PCR反应，大多数情况下可以替代Taq DNA 聚合酶。
● 使用说明：
1.
按照下表在0.2ml
PCR管中制备反应体系：
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成分
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体积
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终浓度
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Template
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0.1-1μg
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as
you wish
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Primer
1（10
μM）
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1μl
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200nM
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Primer
2（10
μM）
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1μl
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200nM
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10×Taq
plus PCR buffer
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5μl
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1×
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dNTP
Mixture(10 mM)
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1μl
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200μM
each
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Taq
plus(5 U/μl)
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0.5-1μl
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2.5-5U
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ddH2O
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up
to 50μl
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-
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2.
混匀后，离心快甩将反应液收集到管底。
3.
PCR仪如果没有热盖加热的话，补加25μl矿物油。
4.
PCR仪上执行以下程序：
三步法：
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步骤
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温度
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时间
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循环数
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初始变性
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94℃
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1-5 min
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1
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变性
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94℃
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30 sec
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25-40*
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退火
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Tm-5℃*
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30 sec
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延伸
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72℃
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1 min/kb
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最后延伸
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72℃
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5 min
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1
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*注： PCR 反应条件视模板、引物等的结构条件不同而各异。在实际操作中需根据模板、目的片段的大小、碱基序列和引物的长短等具体情况，设定最佳的反应条件（温度、时间等）。
● 常见问题：
Q1：Taq plus DNA polymerase能扩增多长片段？
A1：对简单模板（如λ噬菌体做模板），可以扩增 kb片段；对复杂模板（如基因组DNA），可以扩增 kb片段。
Q2：Taq plus DNA
polymerase保真性怎样？
A2：Taq plus含有3’-5’校对活性的聚合酶，有校对功能。保真性为普通Taq酶的3倍。
Q3：使用Taq plus DNA
polymerase的扩增产物是否可以进行TA克隆？
A3：由于使用Taq plus得到的PCR产物大多数带有A，可以进行TA克隆。
Q4：Taq plus DNA
polymerase可以扩增高GC含量片段吗？
A6：Taq plus可以扩增高GC含量片段，建议使用Taq plus配合2×GC buffer使用，而不建议使用10×Taq plus PCR buffer。
Taq Plus DNA Polymerase扩增效果
M: DNA Marker III
1: Rice PEPCase 8.6kb
2: Rice PEPCase 5.2kb
3: Rice PEPCase 3.2kb
4: pCMV-Myc 3kb
5: pCMV-Myc 2kb
