Western快速封闭液
Rapid Blocking Buffer for
WB
● 产品组成:
货号
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名称
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规格
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保存条件
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WR5020-100ml
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Western快速封闭液
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100 ml
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2-8℃
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WR5020-500ml
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Western快速封闭液
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500 ml
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2-8℃
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说明书
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一份
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● 产品简介:
本产品专为快速高效封闭Western Blot 转印膜而设计,避免抗体与封闭剂的非特异结合,最大程度地降低了背景。同时,本封闭剂无内源的磷酸化蛋白及生物素,对磷酸化特异抗体及生物素检测也不会产生干扰。本封闭剂不与蛋白产生非特异性结合,因而只封闭膜而不会屏蔽样品蛋白的抗体识别位点,大大提高了抗体检测灵敏度。实验表明,本封闭剂对许多抗体都有不同程度的信号增强作用。然而这种信号增强作用因抗体而异,对某一特定抗体,并不一定具有确定的信号增强作用。
注意: 没有任何一种封闭剂能适合所有抗原和抗体的检测系统。如出现本试剂不适合的抗体,请替换使用其它种类的封闭剂如BSA或脱脂奶粉等。
● 贮存、效期及运输:
2-8℃贮存,有效期一年,常温运输。
● 注意事项:
1. 快速高效:5-10 min内完成封闭;只结合封闭转印膜而不结合蛋白,因此不会屏蔽样品蛋白的抗体识别位点,与传统的脱脂奶粉和BSA 封闭相比信噪比更高;
2. 方便快捷:无需稀释,即取即用;
3. 性能可靠:与抗体无交叉反应;
4. 应用范围广:无磷酸化蛋白,无生物素,尤其适合磷酸化特异抗体及生物素检测系统;
5. 节省抗体:使用本封闭剂后,所需的最适抗体浓度低于常规使用浓度,可大大节省抗体使用量。
6. 与PVDF膜相比,NC膜需要更长时间的封闭。
● 使用说明:
1. 本产品无需稀释,开盖即用。
2. 完成转膜后,使用TBST漂洗转印膜3次,每次5分钟;
3. 将转印膜放入到杂交孵育盒中,加入10-20 ml快速封闭液完全覆盖转印膜,置于摇床轻轻摇动,参考下表确定封闭时间:
膜类型
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推荐封闭时间
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反应温度
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PVDF膜
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5-10分钟
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常温 25度
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NC膜
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10-20 分钟
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常温25度
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注意:使用本产品,PVDF膜和NC膜使用推荐封闭时间,经多种抗体的测试封闭效果显著优于常规的BSA封闭1 h。对于一些背景非常高的抗体,可以尝试延长封闭时间。如有特殊需要,也可4℃封闭过夜。
4. 封闭结束后弃去封闭液,进行Western Blot后续操作。